Annibale Ninchi naît à Bologne le d'Arnaldo Ninchi et de Lidia Bedetti. Son père Arnaldo est un colonel du Génie originaire d'Ancône[1]. Il sera le premier d'une famille d'acteurs, parmi lesquels son frère Carlo Ninchi, sa cousine Ave Ninchi et son fils Arnaldo Ninchi.
En 1903, il s'inscrit à Florence à l'école royale de théâtre Tommaso Salvini dirigée par Luigi Rasi(it). La même année, il rentre dans la troupe de Giacinta Pezzana et Flavio Andò.
Il commence au cinéma muet dès 1909. Le , il est initié à la franc-maçonnerie auprès de la Loge XI à l'Orient de Pesaro. En 1911, il passe au teatro Argentina, puis en 1916 à la Compagnie dramatique de Rome. En 1919, il entre dans la troupe d'Ernesto Ferrero et Maria Letizia Celli. Il fonde ensuite sa propre troupe, la Compagnia drammatica italiana Annibale Ninchi, dont il est le principal acteur. Il reviendra ensuite aux troupes des autres.
En 1925, son spectacle Le Cocu magnifique est suspendu par le gouvernement fasciste. Il joue donc pour la première fois dans un premier rôle en 1937 dans Scipione l'Africain de Carmine Gallone, dans lequel son frère Carlo a aussi un petit rôle. Il enseigne ensuite à l'Accademia Nazionale di Arte Drammatica "Silvio D'Amico" di Rome. Certaines des pièces où il joue sont diffusées à la radio et à la télévision.
En 1946, il écrit une autobiographie, Annibale Ninchi racconta... (Pagine spregiudicate di un chierico-vagante), où il raconte la vie des acteurs au début du XXe siècle. Il a aussi écrit de nombreux textes de théâtre.