La coupe de Tunisie de football 2000-2001 est la 45e édition de la coupe de Tunisie, la 70e depuis 1923. C'est une compétition à élimination directe mettant aux prises des centaines de clubs de football amateurs et professionnels à travers la Tunisie. Elle est organisée par la Fédération tunisienne de football et ses ligues régionales.
Ce tour regroupe les quatorze clubs qualifiés du tour précédent et six clubs de la Ligue I, les six premiers classés du championnat précédent étant qualifiés d'office pour les huitièmes de finale.
Le match est arbitré par un trio marocain, Mohamed Kazzaz, Abdelmajid Hadidi et Abdelmajid Katalouri, alors que Aouaz Trabelsi est le quatrième arbitre.
Meilleur buteur
Tahar Sebaï, Walid Khaled (CSHL) et Abdelmoneim Drine (ESZ) ont marqué trois buts chacun.