Het seizoen 2000/01 van de KNVB Beker (officieel Amstel Cup 2000/01 genoemd) was de 83e editie van de Nederlandse voetbalcompetitie met als inzet de KNVB Beker en een plek in de UEFA Cup 2001/02. 86 ploegen uit de Eredivisie, Eerste divisie en verschillende amateurklassen namen deel aan het toernooi, dat bestond uit een groepsfase en zes knock-outronden. FC Twente won deze editie door in de finale PSV te verslaan.
Deelnemers
Aan de Amstel Cup 2000-2001 namen achttien Eredivisieteams, achttien Eerste-divisieteams, 48 amateurclubs en twee beloftenteams van profclubs deel.
PSV, sc Heerenveen, Feyenoord, Vitesse, Ajax en Roda JC waren in verband met deelname aan de Europacup vrijgesteld tot de achtste finales. RKC was wegens deelname aan de Intertoto vrijgesteld voor de groepswedstrijden en mocht in de eerste ronde instromen.
De groepsfase vond plaats tussen 8 augustus en 13 september 2000. Er werd gespeeld in een halve competitie. Totaal waren er 117 wedstrijden. Van de profclubs werden Telstar en Haarlem uitgeschakeld.
Aan de eerste ronde namen veertig ploegen deel. 39 daarvan hadden zich geplaatst via de groepswedstrijden. RKC was daarvoor vrijgesteld en mocht in de deze ronde instromen.
Aan de derde ronde (ook wel achtste finales genoemd) namen zestien ploegen deel. Tien hadden zich geplaatst na winst in de tweede ronde. De overige zes waren door de KNVB in verband met Europa Cup-verplichtingen vrijgesteld voor de groepsfase en de eerste twee ronden.
Ajax was door een verlies in eigen huis tegen Vitesse na één wedstrijd reeds uitgespeeld. Van de vijf teams uit de Eerste divisie die nog in de strijd waren, wist enkel FC Zwolle zich te plaatsen voor de volgende ronde, door een 5-1-zege op Heracles Almelo. PSV had weinig moeite met provinciegenoot FC Den Bosch en won mede dankzij drie treffers van Mateja Kežman met 4-1.
Aan de kwartfinale namen acht ploegen deel. Deze hadden zich geplaatst door winst in de derde ronde.
FC Zwolle was de laatste actieve club uit de Eerste divisie. De ploeg werd met 4-3 uitgeschakeld door FC Twente. Ook voor Feyenoord viel het doek in de kwartfinale. sc Heerenveen was met 4-3 te sterk. PSV en Vitesse bekerden door respectievelijk Roda JC en AZ te verslaan.
Aan de halve finale namen vier ploegen deel. Deze hadden zich geplaatst door winst in de kwartfinale.
PSV had het moeilijk tegen sc Heerenveen, maar waar de Friese club de kansen miste had de Brabantse club de beschikking over Ruud van Nistelrooy, die twee doelpunten maakte. Vitesse en FC Twente kwamen ondanks een spannende onderlinge strijd niet tot scoren. In de strafschoppenserie was Twente echter de betere: 4-3. Marc van Hintum miste voor Vitesse de laatste strafschop, terwijl Jan Vennegoor of Hesselink wel raak schoot.
De finale vond plaats op Hemelvaartsdag 2001. In de reguliere speeltijd en de verlenging werd niet gescoord, waarna strafschoppen de beslissing moesten brengen. PSV liep in de penaltyreeks snel uit naar 3-1, doordat Jan Vennegoor of Hesselink en Jeroen Heubach niet wisten te scoren.
Jan Vennegoor of Hesselink van FC Twente scoorde drie doelpunten in de groepsfase en vijf doelpunten in de knock-outfase en werd met acht doelpunten topscorer van het toernooi.
Zie KNVB Beker 2000/01/Groepsfase voor de wedstrijdstatistieken en poule-eindstanden in de groepsfase.
· 
· 
.svg){kind=small}
.svg){kind=small}
.svg){kind=small}
