RNAポリメラーゼ[ 注釈 1] (RNA polymerase ) とは、リボヌクレオチド を重合させてRNA を合成する酵素 （RNA合成酵素 ）。
DNAの鋳型鎖（一本鎖）の塩基配列を読み取って相補的なRNAを合成する反応(転写 )を触媒する中心となる酵素をDNA依存性RNAポリメラーゼ という（単に「RNAポリメラーゼ」とも呼ぶ）。真核生物 では、DNA を鋳型にしてmRNA やsnRNA 遺伝子 の多くを転写 するRNAポリメラーゼII rRNA 前駆体を転写するRNAポリメラーゼI 、tRNA とU6 snRNA 、5S rRNA 前駆体等を転写するRNAポリメラーゼIII
また、RNAを鋳型にRNAを合成するRNA依存性RNAポリメラーゼ RNAウイルス で重要な機能を果たす以外に、microRNA の増幅過程にも利用される。
鋳型を必要としない物もあり、初めて発見されたRNA ポリメラーゼであるポリヌクレオチドホスホリラーゼ（ポリヌクレオチドフォスフォリレース、ポリニュークリオタイドフォスフォリレース）もそのひとつとしてあげられる。この酵素は実際には細菌 の細胞 内でヌクレアーゼ として働くが、試験管内ではRNAを合成することができる。これを利用して一種類のヌクレオチド からなるRNAを合成し、それから翻訳 されるタンパク質 を調べることで初めて遺伝暗号 の決定が行われた。真核生物のもつpoly(A)ポリメラーゼも同様に鋳型を必要とせず、Pol II転写産物の3'末端にpoly(A)鎖を付加することで転写後の遺伝子発現制御機構の一端を担っている。
真核生物の転写装置（RNAポリメラーゼ ）は、Pol I、Pol II、Pol IIIの3種がある。それぞれ10種類以上ものサブユニットから構成される（基本的には12種）。また、古細菌のRNAポリメラーゼもサブユニット数が多く、9-14種のサブユニットから構成されている。ユーリ古細菌 ではいくつかのサブユニットが省かれているが、一部のクレン古細菌 には真核生物の12種類のサブユニットが全て保存されており、真核生物の持つ3種のRNAポリメラーゼの祖先型と考えられている。古細菌のRNAポリメラーゼは、Aサブユニットが2つに分かれている特徴がある。
一方で、真正細菌のRNAポリメラーゼは全体的に真核生物や古細菌のものより単純な構成である。ααββ'ωの4種5サブユニットからなるコアエンザイムに、σが会合したホロエンザイムと呼ばれる形態で正常なプロモーターを認識する。シグマ因子 は遺伝子上流のプロモーター 配列を認識して転写を開始する役割を担っている。
大腸菌のRNAポリメラーゼホロ酵素 RNA polymerase holoenzyme は2分子のα (α1, 2) および1分子ずつのβ 、β’ 、σ 、ω サブユニット を含む[ 1] RNAポリメラーゼコア酵素 (RNA polymerase core enzyme, コアポリメラーゼ (core polymerase))と呼ぶ。コア酵素は実際にRNAを合成する部位で、σサブユニット（σ因子 ）はコア酵素を特定の遺伝子に導き、ホロ酵素の特異性 specificity (σはギリシャ文字 のs) を担うといえる[ 2]
それぞれの項で各サブユニットを紹介する。
RNAポリメラーゼホロ酵素において2つ存在するαサブユニットは、開始段階ではプロモーターのUPエレメント の認識を担う。一方、伸長段階になるとコア酵素の会合 を含む様々な活性を示す。
リチャード・グルース (Richard Grouse) らはα235 (C末端の94アミノ酸 が欠損 。正常なαサブユニットのアミノ酸数は329であるため、94アミノ酸を失い235) およびR265C (N末端から265番目のアルギニン をシステイン に置換 ) という2つのαサブユニット変異体 について実験を行った。これにより、RNAポリメラーゼホロ酵素がUPエレメントを認識しないことが明らかにされた[ 3] リチャード・エブライト (Richard Ebright) らはタンパク質限定分解法 を用いて、αサブユニットのN末端およびC末端がそれぞれ独立してα-NTD (amino terminal domain of the α subunit) およびα-CTD (carboxyl terminal domain of the α subunit) というドメイン を形成することを突き止めた[ 4] 大腸菌 である。N末端ドメインは8〜241付近を含む28 kD 、C末端ドメインは249〜329(末端)付近を含む8 kDである。グルースとエブライトらはまた、両者が明確な構造 (モチーフ ) をとらない、少なくとも239〜251の13アミノ酸による連結鎖でつながっていることも発見した[ 5]
このことから、α-CTDの機能について一つの仮説が考えられる。RNAコア酵素においてほかのタンパク質と相互作用するのはα-NTDであり、αCTDは連結鎖の先でコア酵素から離れている。しかし、UPエレメントに対して強力に結合し、DNAとホロ酵素とのつながりをさらに強固に補う[ 5] [ 6] RF複合体の立体構造解析 から、2つあるUPエレメントのうち-40付近のものはα1が、-60付近のものはα2が連結することが示されている。
β'サブユニットとともに転写産物の伸長を担う。どちらもDNAとの結合部位を持つが、βサブユニットのそれはN末端[ 注釈 2] Met 30〜Met102の領域である[ 7] 静電相互作用 で弱く結合する。エフゲニー・ナドラー (Evgeny Nudler) の1996年の実験 によると、DNAの-6〜+1が結合標的であり、転写中この部位は融解 している[ 8] [ 7]
ホロ酵素の活性部位を構成するタンパク質の一つであり、補因子 であるMg+ と結合する3つのアスパラギン酸 を持つ。
βサブユニットは微生物 に対する代表的な抗生物質 であるリファンピシン とストレプトリジギン の直接的な作用標的である[ 9] 阻害 する。ただし、ストレプトリジギンは開始段階に効果があるとされている。これは、開始段階にも10ntのRNA（アボーティブ転写産物）を合成する過程[ 注釈 3] [ 9]
β'サブユニットは、転写の開始段階においてRNAポリメラーゼホロ酵素が-11〜+1位を巻き戻すことを助ける[ 9] 開放型複合体 の形成[ 注釈 4] 非鋳型鎖 [ 注釈 5] キャロル・グロス (Carol Gross) らの研究によると、結合はβ'の262〜309のアミノ酸 領域が促す[ 3]
伸長段階においてはRNAポリメラーゼホロ酵素のDNA結合を担う。すなわち、C末端[ 注釈 2] Met 1230〜Met1273で+2〜+11の領域に強く疎水性相互作用 する[ 8]
特に転写開始段階 [ 注釈 3] 緩い結合部位 、loose binding site）に弱く結合する。滑って移動し、プロモーターに出会うかそのまま遊離する。これにより、RNAポリメラーゼによる転写を行う遺伝子の発見は加速される。速度定数 にして1010 M-1 s-1 で、滑らずにDNAへ無差別に結合と解離を繰り返す場合の100倍である[ 10] [ 11] 半減期 は約60分と長い[ 11] [ 11] プロモーター を、半減期が数時間になるほど強固に結合させる。ホロ酵素とプロモーターの会合定数 はほかの配列と比較して平均約107 倍であり、コア酵素の平均1000倍にもなる[ 11] 6 〜1012 と幅広く、rRNA のような約1秒に1回からlacI 遺伝子[ 12] [ 注釈 4] [ 13]
伸長段階に移行するとき、RNAポリメラーゼは構造 を変えるが、このときσ因子の結合は極端に弱くなる。トラバーズ (Travers) とバージェス (Burgess) の研究によると、σ因子が伸長を促進することはない[ 14] [ 14] σサイクル という循環 の中では当初、伸長前に必ず離れるものと考えられていたが、現在では結合が弱くなるだけという説が有力である[ 15] [ 13]
特別な遺伝子 を専任するσ因子もある。あらゆる真正細菌は、成長 機能に関する遺伝子(通常の増殖 に必要な遺伝子)を転写する主要σ因子 (primary σ factor, σA ) を持つ。例えば、大腸菌 ではσ70 であり、枯草菌 ではσ43 である[ 16] kD と43 kDで、右上の番号は分子量 に由来する。ほかにも、熱ショック遺伝子 や胞子 形成遺伝子なども特別なσ因子が担当する[ 16] 環境条件 によって適切な遺伝子群を発現するためで、この使い分けは特に枯草菌 を用いた研究によって明らかとなった。普段はσ43 が転写制御に当たっているが、栄養 状態が悪くなった場合などには他のσ因子（σH など）が発現し、胞子 形成の準備を始める。その後母細胞 ではE、Kと変化し、胞子ではF、Gが使用される。
あらゆる真正細菌におけるσ因子のアミノ酸配列 は領域1から4に分類できる。ハーマン (Helmann) とチェンバーリン (Chamberlin) は各領域の機能を以下のように提唱した[ 17]
領域1は主要σ因子にしか存在しない。σ因子がRNAポリメラーゼを伴わずにプロモーターと結合することを阻害する。このため、DNAと結合するためにはRNAポリメラーゼコア酵素と結合して、後述する領域2.4と4.2のドメイン を露出させなければならない。σ因子単独の結合はコア酵素とプロモーター間の結合の阻害 につながるためこの機能は重要である。
領域2は全てのσ因子に存在し、あらゆる生物で最も共通性が高い[ 18] αヘリックス を形成すると予測されるアミノ酸配列を含んでいるが、実際に-10ボックスを認識することはリチャード・ロジック (Richard Losick) が代償変異 の実験 で証明した[ 18]
領域3はコア酵素とDNA両方の結合に関与する。領域3と4をつなげる連結鎖は、ほとんどの転写で最初に合成されるアデニン との特異的 な結合に関わり[ 19] #真正細菌のホロ酵素－DNA複合体 の(3)で詳述)。合成されたばかりのアデニンはDNAとの2本の弱い水素結合 でしか支えられておらず、ホロ酵素との特異的な結合が必要である。連結鎖を欠いたホロ酵素を用いた実験では、最初の2つのリボヌクレオチド の一方、または両方が通常よりはるかに高濃度 でなければ転写が始まらないことが確認された[ 19]
領域4は4.1と4.2に分けられ、ホロ酵素のプロモーター認識において重要と考えられている。領域4.2はヘリックスターンヘリックス というDNA結合ドメイン を含み、-35ボックスに強く結合する。
伸長段階を実行するDNAポリメラーゼを中心とした複合体の立体構造 についての研究は、1999年にセス・ダースト (Seth Darst) によるThermus aquaticus 大腸菌 のDNAポリメラーゼのX線結晶構造解析には成功していない。しかしながら、二次元 結晶 の電子顕微鏡 で観察した大腸菌コアポリメラーゼの全体の形状は酷似しているため、詳細な構造も似ていると考えられている[ 20]
T. Aquaticus のRNAポリメラーゼコア酵素はカニ のはさみ のようである。主にツメの一つはβサブユニット、もう一つはβ'サブユニットが占める。α1と2はヒンジ にあり、それぞれβ、β'に結合している。小さなωサブユニットはβ'サブユニットのC末端[ 注釈 2] 峰 に存在する。触媒活性中心 活性中心溝 (channel) における付け根にある[ 21] Å の空間である[ 22] [ 23] マグネシウム イオン (Mg2+ ) がβサブユニット中の3つのアスパラギン酸 にキレート 結合している。この3つはアミノ酸配列 N A DF DG D（Dがアスパラギン酸）に含まれており、全ての細菌で保存されている[ 20]
2002年のダーストらのX線結晶構造解析 から3つの結論が出された[ 24] A ）とβおよびβ’サブユニットとの間には広い範囲の相互作用 がある。(2) σ因子のN末端[ 注釈 2] アミノ酸 (ドメイン 1.1三次構造 のないループ はRNAポリメラーゼホロ酵素の活性部位 に近く、また転写産物の出口に存在している。
2番目で欠損している部位を解釈しているのは、ダーストらは完全なホロ酵素を結晶化 することができず、ドメイン1.1を欠損したσのそれを撮影に用いたからである[ 25] 中性pH で約3分の1の残基 が負電荷 となるほど酸性アミノ酸が非常に多い。塩基性アミノ酸が並ぶ活性部位にいかにも強く結合できそうである。ダーストらはこれを、ドメイン1.1は小さすぎる入口をこじ開けてDNAを内部に結合させるためと考えた[ 25] 融解 し、ホロ酵素は閉鎖型複合体[ 注釈 3] ヒドロキシルラジカル にさらされるためのようである。リチャード・エブライト は閉鎖型複合体のドメイン1.1が開放型複合体では消えていることを蛍光共鳴エネルギー移動 実験で証明した[ 25]
3番目の見解には2つの解釈がある。第一に、σ因子は活性部位 に近づくことでリン酸ジエステル結合 の形成に携わる。第二に、ループの連結鎖は転写産物の出口を塞ぐことで、アボーティブ転写産物の形成を行う[ 注釈 3] 競合 をするという仮説がある[ 26] 大腸菌 では11倍過剰[ 26] [ 26] 活性部位 に存在するための副産物 であると推測される。伸長の礎となる短いDNAを結合させるためσ因子が活性部位に接近することで、必然的に連結鎖は出口を塞いでいると考えられる[ 26]
T. aquaticus のRNAポリメラーゼ伸長複合体。DNAは青、RNAは赤、活性部位にあるマグネシウム イオン は黄色で示す。ホロ酵素とDNAによって形成される複合体は、転写時の状態であるためRF複合体 (replicative form complex、RFは複製型) と呼ばれる。ダーストらは下図のフォークジャンクションDNA にT. aquaticus のDNAポリメラーゼホロ酵素を結合させた、RF複合体を作成した。このDNAは、-35ボックス を含むほとんどが二本鎖だが、-10ボックス 中の非鋳型鎖[ 注釈 5] #真正細菌のβサブユニット )。
RF複合体の立体構造から、様々な事実が判明した。ホロ酵素に結合するDNAはσサブユニットがある場所を横切る。大腸菌 のプロモーター においては、-12位の塩基 がσ70 因子の領域2.4のGln 437およびThr 440と相互作用している。T. aquaticus のσA で2つのアミノ酸はGln260とAsn 263とに相当する。
Trp 256は-10ボックス 直前の-12位に非常に近い。T. aquaticus σA のPhe 248、Tyr 253、Trp256や大腸菌σ70 における一部の3 芳香族 アミノ酸は高度に保存されている。これらは開放型複合体の-10ボックスの非鋳型鎖に結合することで、プロモーターの融解 に関与すると予測される。観察されたTrp256の位置から-11位の塩基対 の代わりとなり、融解を促進する可能性が高い。
σの領域2.2と2.3における2つの保存された塩基性 アミノ酸(Arg 237とLys 241)が 静電相互作用 で結合していることが観察された。しかし、領域4.2の残基は35ボックス に結合していない。ダーストらは、RF複合体の結晶化の際に、-35ボックスが領域4.2に対する正常な位置から押し出されてしまったと結論付けた[ 27] [ 27] DNaseⅠ の標的部位が生じる。一方、下流領域では二重らせんが融解する。こうして閉鎖型から開放型へと複合体が移行する。開放型複合体でのDNAや各タンパク質の相互作用も立体的に解析された。-10ボックスがβとβ‘サブユニットの間で融解するが、これはβ’舵型構造 によって維持される。この構造はβ’サブユニットの表面から隣接するβサブユニットに向けて、また分離した2つのDNA鎖の間隙に突き出す。これによって、DNAの再会合 は阻止される。
活性部位には2つのMg+ が3つのアスパラギン酸 によって支えられる。
非鋳型鎖
-40 -30 -20 -10
5' GGCCGC|TTGACA|AAAGTGTTAAATTG|TG|C|TATACT 3'
3' CCGGCG|AACTGT|TTTCACAATTTAAC|AC|G|A 5'
-35ボックス ↑ －10ボックス
拡張した－10ボックス
鋳型鎖
図：RF複合体の作成に使用したDNA
少なくとも開放型複合体になった時点で、ホロ酵素には内部に通じる5つの通路がある[ 21] NTP取り込み通路 は基質 であるリボヌクレオチドを触媒活性中心に迎え入れる。RNA出口通路 は後の伸長段階で合成したRNA鎖の部分を出すためにある。ほかの3つの通路はDNAが出入りするために使う。下流のDNAは下流DNA用通路 から二重らせんのまま活性中心溝に入る。そこでDNAは+3から2本の一本鎖に分かれる[ 28] 非鋳型鎖用通路 （NT通路）を抜けてホロ酵素の表面に沿って進む。一方、鋳型鎖は触媒活性溝を突き進み、鋳型鎖用通路 （T通路）から外に出る。2つの一本鎖はホロ酵素の後方にある上流DNAの-11の位置で二重らせんに戻る[ 28]
α-アマニチン (赤)が結合した真核生物のRNAポリメラーゼII。この毒 はmRNA合成を阻害する。真核生物にはRNAポリメラーゼI 、II 、III といった3種類のRNAポリメラーゼがある。1969年にロバート・ローダー (Robert Roeder) とウィリアム・ラター William Rutter が発見した[ 29] rRNA 前駆体 を合成する。RNAポリメラーゼIIは、タンパク質をコードするmRNAのほか、いまだ謎の多いヘテロ核内RNA (heterogeneous nuclear RNA, hnRNA ) や大部分の核内低分子RNA snRNA ) を合成する。hnRNAとsnRNAは成熟mRNA の合成に関わる。RNAポリメラーゼIIIはtRNA や5S rRNA、前述とは別のいくつかのsnRNAの前駆体を担う。また、細胞内の分布も別で、RNAポリメラーゼIは核小体 にだけ、IIとIIIが核質 にだけ存在する。
細菌は開始因子が1つ (σ因子) だけだったが、真核生物では複数の基本転写因子 (general transcription factor, GTF ) を必要とする。しかし、実際にはヌクレオソーム があるためさらにDNA結合調節タンパク、いわゆる介在複合体、ヌクレオソーム修飾酵素をはじめとしたいくつかのタンパク質を必要とする[ 30]
RNAポリメラーゼIIのサブユニット構成は、1971年にピエール・シャンボン (Pierre Chambon) らとラターらのグループから独立に報告された[ 31] マウス 由来の全てのRNAポリメラーゼから、ローダーらがほぼ完全な情報を明らかにした[ 31]
ヒト と酵母 におけるポリメラーゼIIの12個のサブユニットについて下の表にまとめた。これらは各々単独の遺伝子 にコードされている。各サブユニットの名前はその遺伝子の名前に由来する。RPBという名称は、シャンボンが用いたRNAポリメラーゼB (すなわちII) という呼び名にちなむ。
リチャード・ヤング (Richard Young) はエピトープタグ法 で同定した10個のサブユニットを3つに分類した[ 31] コアサブユニット 、少なくとも酵母では3種類の核内RNAポリメラーゼ全てにある共通サブユニット (common subunits)、必ずしも酵素活性にいつも必要ではない非必須サブユニット の3つである。
電気泳動 の結果から、Rpb1サブユニットには215 kDのIIa と240 kDと測定されたIIo の2つの形態が存在する。IIa のC末端にはCTD (carboxyl-terminal domain) と呼ばれる、7個のアミノ酸（heptad ）から成る共通配列 Tyr -Ser -Pro -Thr -Ser-Pro-Ser が反復した配列がある。IIo はCTDのヒドロキシ基 を持ったアミノ酸（セリン、スレオニン、チロシン）がリン酸化 したものである。しかし、哺乳類 のhaptadは52回反復するが、これが全てリン酸化したとしてもIIa とIIo の分子量差を埋めることはできない。実際の分子量が大きく見えるよう、泳動度 が遅くなるよう、リン酸化は立体構造 の変化を引き起こすと考えられている。異なるRpb1サブユニットを所有するRNAポリメラーゼIIをそれぞれRNAポリメラーゼIIA (RNA polymerase IIA) およびRNAポリメラーゼIIO (RNA polymerase IIO) と区別する。前者はプロモーター に最初に結合するときの形態で、後者は伸長反応を行う。
ヒトと酵母におけるRNAポリメラーゼIIのサブユニット[ 32]
サブユニット
酵母遺伝子
酵母タンパク質のモル質量 （kD）
特徴
hRPB1
RPb1 192
コアサブユニット。CTDを含み、DNAと結合する。プロモーターの選別に関与。β’と相同。
hRPB2
RPb2 139
活性部位を含むコアサブユニット。プロモーターの認識と伸長速度に関与。β’に相同。
hRPB3
RPb3 35
コアサブユニット。原核生物のαサブユニットと相同 で、Rpb11と機能する可能性あり。
hRPB4
RPb4 25
非必須サブユニット。Rpb7と複合体を形成し、ストレス応答に関与する。
hRPB5
RPb5 25
共通サブユニット。転写アクチベーター の標的。
hRPB6
RPb6 18
共通サブユニット。複合体形成と安定化に寄与。
hRPB7
RPb7 19
定常期 のRpb4と複合体を形成。
hRPB8
RPb8 17
共通サブユニット。オリゴヌクレオチド ／オリゴ糖 結合ドメイン 。
hRPB9
RPb9 14
伸長に関与する可能性があるZnリボンモチーフ を含む。プロモーターを認識。
hRPB10
RPb10 8
共通サブユニット。
hRPB11
RPb11 14
原核生物のαサブユニットと相同で、Rpb3と機能する可能性あり。
hRPB12
RPb12 8
共通サブユニット。
ロジャー・コーンバーグらは2001年に X線構造解析 の結果を発表した[ 33] 酵母 変異株 のもの（polII Δ4/7）だった。これは転写を開始できないが、伸長反応は問題なくできる。
全体の構造は巨大な顎 のようで、酸性 のDNAをくわえる深い溝がある。このため残りの酵素表面は酸性であるのに対し、溝には塩基性 残基が並ぶ。上顎はRpb1とRpb9、下顎はRpb5である。底の触媒活性中心には2個のMg2+ があり、コーンバーグらはメタルA (metal A) とメタルB (metal B) に区別した[ 34] アスパラギン酸 と強固に結合している。一方、メタルBはRpb1のD481、Rpb2のE 836とD837に囲まれているものの、配位結合 するには距離がある。触媒反応の過程でこれら酸性アミノ酸が近づくと考えられる。メタルBは基質 のリボヌクレオチド三リン酸と結合する。
真正細菌同様、RNAポリメラーゼIIにもポア1 (pore 1) という、合成したRNAを出す出口が存在する。漏斗状のポア1外縁には、出てきたRNAを切断するTFIIS と結合するアミノ酸が並ぶ[ 34] クランプモジュール (clamp module) が回転することによって開閉される[ 35]
コーンバーグらはDNAと合成したRNA両方と結合したRNAポリメラーゼIIの撮影にも成功した[ 35] [ 36] [ 37] リン酸 に結合できる位置にある[ 36] ブリッジヘリックス (bridge helix) が観察される。まっすぐに伸びた状態では基質 のリボヌクレオチド三リン酸が入れるようポア1は開いている。一方で、Thr831とAla 832の付近で曲がる状態もあり、活性中心は閉ざされる[ 36]
内部のDNAは入口の所でその先にある壁のために無理やり曲げられる。酵素表面でほどかれた鋳型鎖はRNAと二重らせん形成するが、この長さはラダー (rudder, 舵) と呼ばれるタンパク質が障害物となり9bpに制限される[ 37] [ 37]
^ 「ポリメラーゼ」は、より英語発音に近い「ポリメレース」と表記されることもある。
^ a b c d タンパク質は様々な立体構造をとっているが、本来はアミノ酸が鎖のようにつながった直鎖状高分子 である。この直鎖の末端は残基 がアミノ基 か酢酸 かでそれぞれN末端、C末端と区別する。RNAポリメラーゼおよびDNAポリメラーゼの酵素活性、すなわち転写とDNA複製はN末端からC末端へと進む。したがって、タンパク質のアミノ酸構成を示すとき、N末端を左に順番にアミノ酸を書き並べる。この中の特定のアミノ酸の位置および区間はN末端から数えた番号で示す。
^ a b c d 転写は開始、伸長、終了の3段階からなる。開始段階では、RNAポリメラーゼがホロ酵素を形成してDNAのプロモーター に結合する。初め、DNAは二重らせんを形成したままで、このときのホロ酵素を閉鎖型複合体と呼ぶ。その後、二重らせんはほどかれ、開放型複合体になる。アボーティブ転写産物と呼ぶ数ヌクレオチドのRNAが合成される。伸長段階に入って遺伝子が本格的に転写される。
^ a b 転写の開始段階において、DNAポリメラーゼがRNA合成をできるようにするべく本来二重らせんであるDNAを一本に巻き戻す。まず、DNAポリメラーゼは二重らせんDNAに結合してする。次に巻き戻しを行うが、このとき一本鎖DNAとホロ酵素とを開放型複合体と呼ぶ。
^ a b DNAは二重らせんを形成しているが、RNAポリメラーゼが転写を行うのはこのうち1本である。転写されるほうを鋳型鎖 、されないほうを非鋳型鎖 と呼ぶ。
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