Autry era filho de um pastormetodista. Depois de deixar a escola, trabalhou como telegrafista na Estrada de Ferro St. Louis-San Francisco em Ravia, Oklahoma, onde passou a viver. Apresentava-se em bailes locais, cantava e tocava violão. Foi convidado a participar de um programa de rádio em 1928, o que marcou o início de sua carreira artística. Assinou seu primeiro contrato para gravar discos em 1929, com a Columbia Records. Sua canção That Silver-Haired Daddy of Mine foi um sucesso, o que o levou a trabalhar por quatro anos no programa de rádio National Barn Dance, em Chicago, Illinois. Em 1932, casou-se com Ina Mae Spivey, falecida em 1980. Em 1981, casou-se com Jacqueline Ellam, com quem viveu até à morte. Entre suas inúmeras gravações clássicas incluem-se "I'm Back in the Saddle Again", "(Ghost) Riders in the Sky", "Tumbling Tumbleweeds" e diversas canções de Natal, como "Rudolph the Red-Nosed Reindeer", "Here Comes Santa Claus" e "Santa Claus Is Coming to Town".
Autry parou com os shows em 1964, com uma carreira de mais de seiscentas gravações e quase duzentos filmes e programas de TV. Foi também um empresário de visão: adquiriu quatro estações de rádio e uma de televisão; ações de dois jornais de Phoenix, Arizona; e vinte e cinco poços de petróleo, no Texas. Foi dono ainda de muitas propriedades em vários estados, editoras musicais e hotéis, além de ter investido pesadamente no time de beisebolCalifornia Angels.
Carreira no cinema
Autry estreou no cinema em In Old Santa Fe (1934), da série de Ken Maynard para a Mascot Pictures. Nesse filme ele apenas cantava, mas isso foi o suficiente para ganhar um papel de (coadjuvante/secundária) no seriado Mystery Mountain (A Montanha Misteriosa), de 1934, igualmente estrelado por Maynard. Em 1935 ficou com o papel principal do seriado The Phantom Empire (O Império dos Fantasmas).
Entre 1935 e 1942, quando alistou-se nas Forças Armadas, Autry fez cerca de cinquenta faroestes B para a Republic. Ao voltar, percebeu que o estúdio já elegera Roy Rogers como seu principal astro. Cinco filmes depois, saiu para fundar a Flying A Productions, onde estrelou mais de trinta produções, todas distribuídas pela Columbia Pictures.
Até 1942, seu sidekick (no Brasil, ajudante, parceiro ou companheiro) foi Smiley Burnette, com quem trabalhava desde os tempos do rádio. Burnette era cantor, compositor e multi-instrumentista. Em 1944, ele deixou a Republic e tornou-se o sidekick de Charles Starrett na série Durango Kid, da Columbia. Com o fim desta, Burnette voltou para os seis últimos filmes de Autry, todos de 1953.
Autry não teve mocinhas constantes. June Storey (dez filmes até 1940) e Gail Davis (quatorze, entre 1950 e 1953) foram as que mais contracenaram com o ator.
Até o início de 1939, a duração de seus filmes ficava entre cinquenta e sessenta minutos. Do final daquele ano em diante, a metragem foi sendo aumentada, ficando entre pouco mais de uma hora e oitenta minutos, sendo que Under Fiesta Stars, de 1941, teve a duração recorde de noventa e quatro minutos. Então os filmes finais voltaram ao padrão de cerca de uma hora ou menos.
Jane Withers, contratada da 20th Century Fox, era fã de Autry. Ela queria fazer um filme com ele, mas não obteve autorização do estúdio para ser emprestada à Republic. Ela então conseguiu que fosse seguido o caminho inverso: assim, o filme Shooting High (Chutando Alto), de 1940, foi rodado pela Fox. Esse foi o único trabalho de Autry naquele estúdio.
O último filme de Autry na Republic foi Robin Hood of Texas (Robin Hood no Texas). E o primeiro para sua recém-fundada produtora foi The Last Round-Up (O Último Rodeio), ambos de 1947.
A maioria de seus faroestes na Flying A foi feita usando o processo SepiaTone que, como o nome indica, dava às películas um tom de cor sépia.
Nos filmes de Autry, a música frequentemente sobrepujava a ação. Especula-se que este seria um dos principais motivos de sua pouca popularidade no Brasil. De fato, a maioria de seus filmes permanece inédita nesse país.[carece de fontes?]
Quadrinhos
As aventuras de Gene Autry foram adaptadas para os quadrinhos inicialmente por Tillman Goodan, que faleceria em 1958. Uma segunda série foi desenhada por Bob Stevens e Bert Laws. Nos jornais foram publicadas tiras de quadrinhos entre 1940 e 1942; e 1952 e 1955. A Editora Dell Comics publicou livros com os quadrinhos do cantor. Dentre os autores, destaca-se Gaylord DuBois.
No Brasil, a EBAL editou um gibi nos anos 50 com o nome do cowboy.