Джузеппе ди Стефано родился в деревне Мотта-Сант'Анастазия, близ Катании в Сицилии в семье сапожника и портнихи. Своё образование он получил в иезуитской семинарии, и в юности даже собирался стать священником.
На протяжении всей карьеры зрители восхищались его прекрасной дикцией, уникальным тембром и бархатным мягким пением. Из-за более тяжёлых вокальных партий, не подходивших для его лирического тенора, которые Джузеппе ди Стефано стал брать в 1950-х годах, его голос стал ухудшаться, из-за чего в 1960-х чуть не завершилась его карьера.
За годы своей карьеры ди Стефано был удостоен «Золотого Орфея», престижной итальянской музыкальной премии.[2] Последний раз в качестве оперного певца он выступил в 1992 году в опере Джакомо Пуччини «Турандот», где исполнял партию старого императора.
В ноябре 2004 года ди Стефано с женой собирались покинуть свою виллу на курорте Диане Бич, недалеко от Момбасы в Кении, когда на них напали неизвестные и жестоко избили певца[2][3]. Ди Стефано в течение нескольких недель не приходил в себя, перенеся при этом две операции. В декабре 2007 года его доставили в одну из клиник Милана, где он впал в кому, из которой так и не вышел.[4] Он был перевезён в свой дом в городке Санта-Мария-Ое, близ Милана, где 3 марта2008 года скончался в возрасте 86 лет[3].
Ди Стефано имел мягкий голос, неповторимый тембр, теплый и богатый, и прекрасную дикцию. Его талант был по достоинству оценен. Ди Стефано можно считать продолжателем старой итальянской вокальной школы.
Многие историки вокального искусства находят Ди Стефано-вокалиста, например в роли Эдгара, достойным наследником великого тенора прошлого века Джованни Баттиста Рубини, создавшего незабываемый образ возлюбленного Лючии в опере Доницетти[5].