Romano Mazzoli genoss zunächst eine private Schulausbildung in seiner Heimatstadt Louisville. Danach studierte er bis 1954 an der University of Notre Dame in South Bend (Indiana). Zwischen 1954 und 1956 diente er als Soldat in der United States Army. Nach einem anschließenden Jurastudium an der University of Louisville und seiner 1960 erfolgten Zulassung als Rechtsanwalt begann er in Louisville in diesem Beruf zu arbeiten. Zwischen 1963 und 1967 hielt er Vorlesungen über das Geschäftsrecht am Bellamine College.
Während seiner Zeit im US-Repräsentantenhaus endete der Vietnamkrieg. 1974 überschattete die Watergate-Affäre das politische Leben in den Vereinigten Staaten. In den Jahren 1971 und 1992 wurden der 26. und der 27. Verfassungszusatz ratifiziert. 1994 verzichtete Mazzoli auf eine erneute Kandidatur. Nach seiner Zeit im Kongress lehrte er an verschiedenen Universitäten Jura. Im Jahr 2002 war er an der politischen Fakultät der Harvard University, der Harvard Kennedy School, tätig. 2006 war er Mitverfasser eines Artikels in der Washington Post, der sich mit den von ihm 1986 mitverfassten Einbürgerungsgesetz in der heutigen Zeit befasste.
Mazzoli starb Anfang November 2022, einen Tag vor seinem 90. Geburtstag.